熒光顯微鏡是以紫外線為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。主要用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光。

熒光顯微鏡觀察到的熒光圖像具有形態(tài)特征，具有熒光顏色和亮度。在判斷結(jié)果時，要結(jié)合起來作出的判斷。結(jié)果是根據(jù)主觀指標(biāo)，即工人的眼睛來記錄的。作為一般的定性觀測，它基本上是的。隨著科技的發(fā)展，客觀指標(biāo)被用來記錄判斷結(jié)果，如使用細(xì)胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但是，這些文書所記錄的結(jié)果也要與主觀判斷相結(jié)合。

熒光顯微鏡的常見問題回答：

1、為什么目鏡下觀察到的圖像只有一半兒？

出現(xiàn)這種情況的原因一般是CT環(huán)調(diào)整出現(xiàn)了問題。CT環(huán)位于目鏡下方，也叫合軸調(diào)中目鏡，有CT/O/S三個參數(shù)設(shè)置。CT對應(yīng)的是光路對準(zhǔn)了望遠(yuǎn)鏡；O對應(yīng)的是光路中沒有物體；S對應(yīng)的是光路中有遮光板。那么上述情況就是CT環(huán)這個螺旋位于CT和S兩個參數(shù)之間。

2、為什么白光觀察下的物體特別暗？

環(huán)狀光闌沒有開至大光圈。環(huán)狀光闌位于光源和聚光器之間，使光線透過聚光器聚焦到標(biāo)本上；或者是光強(qiáng)調(diào)節(jié)旋鈕處于關(guān)閉狀態(tài)。

3、正確觀察熒光的步驟？

關(guān)閉室內(nèi)的燈光，打開白光電源和汞燈電源，一般汞燈需要提前打開10分鐘預(yù)熱才能達(dá)到亮；關(guān)閉熒光shutter，用低倍鏡找到細(xì)胞位置；關(guān)閉透射光按鈕，打開熒光光路shutter，旋轉(zhuǎn)熒光濾色轉(zhuǎn)盤；電腦顯示器中觀察。熒光光路shutter要后打開，先關(guān)閉，這樣可以保護(hù)樣本，避免過度的熒光猝滅。

4、無論怎么調(diào)整細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，鏡下的圖像都不清楚？

這種情況下很可能是鏡頭不干凈，可以用酒精棉擦拭一下鏡面。另外高倍數(shù)的物鏡鏡頭外也有一個旋鈕，適當(dāng)旋轉(zhuǎn)這個旋鈕也會使畫面變得清晰。

5、正確觀察白光的步驟？

將標(biāo)本置于載物臺上，打開電源開關(guān)；將轉(zhuǎn)盤聚光器調(diào)整到明視場，然后將環(huán)狀光闌調(diào)整到大光圈；從低倍鏡開始觀察。

好了，以上便是關(guān)于熒光顯微鏡的相關(guān)內(nèi)容介紹了。