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熒光顯微鏡及熒光數(shù)碼成像拍照的選擇及注意事項(xiàng)的介紹

作者:admin 瀏覽量:192 來(lái)源:本站 時(shí)間:2022-11-25 13:45:02

信息摘要:

熒光顯微鏡是用短波長(zhǎng)的光線(xiàn)照射用熒光素染色過(guò)的被檢物體,使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光,然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應(yīng)用于生物,醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域等。

熒光顯微鏡是用短波長(zhǎng)的光線(xiàn)照射用熒光素染色過(guò)的被檢物體,使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光,然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應(yīng)用于生物,醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域等。

熒光顯微鏡—般分為透射和落射式兩種類(lèi)型。

a.透射式激發(fā)光來(lái)自被檢物體的下方,聚光鏡為暗視野聚光鏡,使發(fā)光不進(jìn)入物鏡,而使熒光進(jìn)入物鏡。它在低倍情況下明亮,而高怕僅暗,在注漫和淘中時(shí),較誰(shuí)操作,尤以低倍的照明被圍準(zhǔn)于確定,但能得到很暗的視野背景。透射式不使用于非透明的被檢物體。

b.落射式目前幾乎被淘汰,新型的熒光顯微統(tǒng)多為落射式,光源來(lái)自被檢動(dòng)依的上方,在光路中具有分光鏡,所以對(duì)透明和不適明的被檢物休體都適用。由于物確起了聚光接的作用,不僅便于操作,而且從低倍到高倍,可以實(shí)現(xiàn)整個(gè)視場(chǎng)的均勻照明。

 熒光顯微鏡.png

(2)熒光鏡檢術(shù)的注意事項(xiàng)

a.激發(fā)光長(zhǎng)時(shí)間的照射,會(huì)發(fā)生光的衰減和淬滅現(xiàn)象,因此盡可能縮短觀察時(shí)間,暫時(shí)不觀察時(shí),應(yīng)用擋板遮蓋發(fā)光。

b.作油鏡觀察時(shí),應(yīng)用無(wú)熒光鏡油"。

c.做熒光實(shí)驗(yàn),普遍熒光比較弱,應(yīng)在較暗的室內(nèi)進(jìn)行。電源可裝穩(wěn)壓器,否則電壓不穩(wěn)不僅會(huì)降低汞燈的壽命,也會(huì)影響效果,目前新研究領(lǐng)域都會(huì)用到熒光顯微鏡,如基因原位雜交FISH)等。

熒光拍攝通常需要使用制冷型CCD(成像系統(tǒng)相機(jī)),因?yàn)橹评銫CD可以減少背景噪聲,對(duì)弱熒光信號(hào)采集很有好處,特別是像單分子成像。采集強(qiáng)光信號(hào)不一定要用制冷CCD,可使用黑白相機(jī),彩色相機(jī)不適合熒光采集,因?yàn)槠涓泄舛鹊汀⒎直媛室驳停菬晒庑盘?hào)很高,對(duì)分辯率要求不高或者使用雙通道濾色片時(shí)才適合用彩色相機(jī)。

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