顯微鏡資訊：單層細(xì)胞自動體視顯微鏡鑒定及培養(yǎng)技術(shù)

單層細(xì)胞自動體視顯微鏡鑒定及培養(yǎng)技術(shù)

培養(yǎng)單層細(xì)胞培養(yǎng)是檢測細(xì)胞系細(xì)胞毒性*常用的方法。偏光顯微鏡用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種顯微鏡。這種顯微鏡的載物臺是可以旋轉(zhuǎn)的，當(dāng)載物臺上放入單折射的物質(zhì)時，無論如何旋轉(zhuǎn)載物臺，由于兩個偏振片是垂直的，顯微鏡里看不到光線，而放入雙折射性物質(zhì)時，由于光線通過這類物質(zhì)時發(fā)生偏轉(zhuǎn)，因此旋轉(zhuǎn)載物臺便能檢測到這種物體。熒光顯微鏡以紫外線為光源， 用以照射被檢物體， 使之發(fā)出熒光， 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。生物顯微鏡用來觀察生物切片、生物細(xì)胞、細(xì)菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究，同時可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細(xì)小顆粒等物體。左圖所示為生產(chǎn)的倒置生物顯微鏡型，該生物顯微鏡也是食品廠、飲用水廠辦QS、HACCP認(rèn)證的必備檢驗(yàn)設(shè)備。然而，這種方法也被用于研究各種類型的腫瘤活檢材料的化學(xué)敏感性，并取得了一些成功。對于人體活檢材料來說，與這種方法相關(guān)的*大問題是:首先，成功率低，因?yàn)槟[瘤細(xì)胞并不能一直貼壁和擴(kuò)張。其次，在腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)中，特別容易出現(xiàn)基質(zhì)細(xì)胞(或成纖維細(xì)胞或間皮細(xì)胞)的污染。某些類型的腫瘤比其他腫瘤更容易出現(xiàn)上述問題。一些細(xì)胞鑒定方法是這種檢測的基礎(chǔ)。這些技術(shù)已經(jīng)被毒理學(xué)家所接受，因?yàn)楹线m的細(xì)胞系可以用來研究特殊器官系統(tǒng)的模型。

從可能的藥物分析處理和回復(fù)條件，以及提高藥效的定量研究方法方面來看，本方法我們可能需要提供了*大的靈活性。上述要求所有教學(xué)方法中，單層培養(yǎng)學(xué)生所需的細(xì)胞數(shù)*少，因此，它很適于在較寬的藥物濃度范圍內(nèi)企業(yè)設(shè)計(jì)多種技術(shù)藥物的篩選，還有一個利于實(shí)現(xiàn)自動化生產(chǎn)作業(yè)，此領(lǐng)域近年來有較快的發(fā)展。當(dāng)細(xì)胞數(shù)很少時，通常將細(xì)胞能夠培養(yǎng)到適于檢測的足夠數(shù)量，盡管沒有經(jīng)過傳代培養(yǎng)后，細(xì)胞的化學(xué)敏感性發(fā)生時間變化。2—3次傳代培養(yǎng)是可行的，實(shí)際上，常建議公司采用傳代方法，因?yàn)樗蓽p少重復(fù)樣品之間的差異。當(dāng)基質(zhì)細(xì)胞環(huán)境污染問題特別嚴(yán)重時，傳代提供了通過各種不同酶處理或物理學(xué)習(xí)方法方式相關(guān)細(xì)胞分離以便“純化”腫瘤組織細(xì)胞培養(yǎng)物的可能性。